V múzeu Smithsonian institut vo Washingtone nastala noc. Strážcovia odišli domov, svetlá zhasli, detskí návštevníci sú doma vo svojich posteliach. Ale i tak je v "prázdnom" múzeu divný šramot. Bývalý nočný strážca Larry Daley (Ben Stiller) je opäť zatiahnutý do ťažko predstaviteľného dobrodružstva, v ktorom ožíva história. Príbeh sa začína vo chvíli, keď Larry zanechal biedne platenú prácu strážcu v múzeu a stal sa žiadaným vynálezcom. Zdá sa, že má konečne všetko, po čom túži, no i tak mu niečo v živote chýba.
Niečo ho ťahá späť do múzea, tam kde to mal rád, kde kedysi zažil neopakovateľnú magickú noc. Larry netuší, že medzi tým sú jeho najobľúbenejšie exponáty (a zároveň jeho najlepší kamaráti) považované za zastarané. A tak, zabalené v debnách čakajú na odvoz do ohromných depozitárov v najväčšom múzeu na svete, v múzeu Smithsonian vo Washingtone. Ich ďalší osud je tak veľmi neistý - teda len do chvíle, než jeden z nich, miniatúrny kovboj Jedediah (Owen Wilson), zavolá Larrymu a opíše mu hroziacu katastrofu.
Egyptský vládca Kahmunrah je po troch tisícročiach spánku vo veľmi mizernej nálade. S trojicou najnenávidenejších prisluhovačov sveta, menovite cárom Ivanom Hrozným, cisárom a vojvodcom Napoleonom Bonaparte a mafiánom Al Caponem zmobilizujú všetkých svojich prívržencov a plánujú prevrat, pri ktorom ovládnu najskôr múzeum Smithsonian a následne celý svet.
Réžia: Shawn Levy
Scénar: Robert Ben Garant, Thomas Lennon
Produkcia: Chris Columbus, Michael Barnathan
Kamera: John Schwartzman
Hudba: Alan Silvestri
Hrajú: Ben Stiller, Amy Adams, Thomas Lennon, Hank Azaria, Dick Van Dyke, Robin Williams, Ricky Gervais, Owen Wilson, Jon Bernthal, Patrick Gallagher, Steve Coogan, Ed Helms, Samuel Patrick Chu, Rami Malek, Mindy Kaling, Craig Robinson, Matthew Harrison, Keith Powell, Bill Hader, Eugene Levy, Christopher Guest, Alain Chabat, Jake Cherry, Jay Baruchel, Jonah Hill, Robert Ben Garant, opice Crystal, Dennis Albanese, Alberta Mayne, Frankie Jonas, Waléra Kanischtscheff, Clifton MaCabe Murray, Caroll Spinney, Rick Dobran, Matty Finochio, Kerry van der Griend, Robert Underwood